Mitsugumin 53 (MG53) es una proteína esencial para la reparación de la membrana celular. Dado que los individuos que padecen síndrome metabólico poseen deficiencia de regeneración tisular y MG53 juega un papel crucial en la restauración de la integridad de la membrana, se estudia la actividad de MG53 en modelos de ratones que presentan trastornos metabólicos. El estudio realizado por Western Blot permitió demostrar que la expresión de MG53 no está alterada dentro de los músculos esqueléticos y cardíacos de los ratones con síndrome metabólico, sino que, los niveles de MG53 en la circulación sanguínea se redujeron lo que puede contribuir a la inadecuada reparación tisular en los pacientes diabéticos. 

ANÁLISIS DEL ARTÍCULO DE "WESTERN BLOT"

TEMA: Efecto del síndrome metabólico en la expresión y función de Mitsugumin 53
OBJETIVOS: Reconociendo la prevalencia de la deficiencia de regeneración tisular mediada por el síndrome metabólico y la función indispensable de MG53 en la restauración de la integridad de la membrana.
TIPO DE MUESTRA: Tejidos del músculo gastrocnemio y los corazones de ratones  silvestres C57 / BL6. Muestras de plasma recogidas en tubos heparinizados, y se centrifugaron a 1000 g durante 20 minutos.
PROTEÍNA ESTUADIADA: Mitsugumin 53 (MG53), proteína esencial para la reparación de la membrana celular.
TÉCNICA MOLECULAR: Los tejidos se aislaron y lisaron con un tampón RIPA (Tris-HCl 25 mM de pH 7,6, NaCl 150 mM, NP-40 al 1%, desoxicolato sódico al 1%, SDS al 0,1%) complementado con un inhibidor de la proteasa cóctel (Roche, Ciencias Aplicadas).
Veinticinco μg de proteína total (muestras musculares) y un μl de plasma se cargaron y se separaron en geles de poliacrilamida SDS al 8%, respectivamente.
Las proteínas se transfirieron entonces a una membrana de difluoruro de polivinilideno y se sondearon con un anticuerpo primario contra MG53 y anticuerpo secundario conjugado con peroxidasa de rábano picante. La actividad de la peroxidasa se desarrolló con kits ECL (Pierce).
La tinción de Panceau S se utilizó para indicar la igualdad en la carga de la muestra.

UCE
MEDICINA

REFERENCIAS:
1. http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0124128#sec002