TEMA:

Polimorfismo del gen C677T de MTHFR y síndrome metabólico: respuesta a la intervención dietética.

OBJETIVOS:

Examinar el papel del polimorfismo del gen C677T MTHFR en la respuesta a la dieta en el tratamiento del síndrome metabólico.

TIPO DE MUESTRA BIOLÓGICA:

Sangre periférica, se recogieron muestras de sangre (10 ml) en tubos estériles que contenían EDTA (Vacutainer®)

TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO A SER EXTRAÍDO:

ADN genómico de leucocitos periféricos, se aisló (lisis, separación y purificación) utilizando el kit de aislamiento de ADN Gentra (Gentra Systems Inc, Minneapolis, MN, EE. UU.)

GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR:

Polimorfismo C677T del gen MTHFR (metilentetrahidrofolato reductasa) (198 pb).

TIPO DE PCR:

PCR en tiempo real (qRT-PCR)

Treinta ciclos:

      - Desnaturalización: 95 °C durante 45 s

      - Hibridación: 64 °C durante 30 s

      - Extensión: 72 °C durante 30 s

VISUALIZACIÓN:

Electroforesis a través de gel de poliacrilamida al 6%, después los productos de digestión se visualizaron mediante tinción con bromuro de etidio.

UCE
MEDICINA

REFERENCIA:
1. https://translational-medicine.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12967-014-0329-4#Abs1